SESIÓN 9

RECUENTO DE ENTEROCOCOS FECALES POR FILTRACIÓN

1-OBJETIVO:

Contar las UFC/ml de enterococos fecales en 100 ml, 50 ml de agua de muestra y 50 ml de agua destilada estéril (1:1), a través de filtración al vacío, en un medio Slanetz-Barnley.

2-FUNDAMENTO:

Es el indicador bacteriológico más eficiente para evaluar la calidad de agua de mar para uso recreativo, debido a que es muy resistente a las condiciones salinas de este medio y además, está relacionado directamente con gastroenteritis, enfermedades respiratorias, conjuntivitis y dermatitis, entre otras. 

La presencia de Enterococcus faecalis y E. faecium es usada frecuentemente para indicar contaminación de origen fecal, E. faecalis es considerado como un indicador de contaminación fecal de fuentes humanas, mientras que E. faecium y otras especies indican contaminación de otras fuentes.

3-MATERIAL:

• Vaso de precipitado x3 (agua destilada estéril, agua muestra, alcohol)
• Embudo
• Probeta 100 ml
• Pipeta Pasteur
• Matraz Kitasato
• Alcohol
• Agua Destilada Estéril
• Placa Petri estéril
• Pinzas
• Mechero Bunsen
• Filtro reticulado

4-PROCEDIMIENTO:

Cogemos 50 ml de agua destilada estéril y 50 ml de agua de muestra, vertimos y enrasamos en la probeta con la pipeta Pasteur, y llevamos a 100 ml.

Una vez hecho este paso, procedemos a filtrar al vacío la mezcla.

Preparamos la bomba de vacío, matraz Kitasato y mechero Bunsen. Echamos un poco de alcohol en un vaso de precipitado, agua destilada estéril en una placa Petri estéril y encendemos el mechero. Mojamos las pinzas en alcohol y flameamos rápidamente en el mechero Bunsen. Tomamos el filtro y lo metemos en agua destilada estéril, retirando el papel de filtro reticulado y colocándolo sobre el matraz. Flameamos las pinzas de nuevo y procedemos a verter la mezcla sobre el embudo del matraz y encendemos la bomba de vacío. Una vez filtrado, volvemos a flamear las pinzas y tomamos el filtro reticulado, colocándolo, con cuidado de no dejar burbujas, sobre el medio Slanetz-Barnley. 

Ponemos fecha y nombre de práctica en la placa para identificarla, y metemos en el horno a 40ºC.

5-RESULTADO:

Después de cultivar no ha aparecido ninguna UFC en el medio.